Choque. 5 de septiembre de 2025. doi: 10.1097/SHK.0000000000002697. En línea antes de imprimir.
ANTECEDENTES: La lesión pulmonar aguda (ALI), reconocida como un trastorno respiratorio grave y prevalente, representa una condición médica crítica. Durante la ALI, la polarización de los macrófagos M1/M2 mediada por el factor de crecimiento endotelial vascular A (VEGFA) es crucial, aunque sus mecanismos reguladores específicos siguen sin estar claros.
MÉTODOS: Las células THP-1 se trataron con lipopolisacárido (LPS)/interferón-γ (IFN-γ). La expresión de VEGFA en el suero de pacientes con ALI se identificó mediante un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA) y una reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa en tiempo real (qRT-PCR). Se empleó citometría de flujo para identificar la expresión de los marcadores de polarización M1 y M2. Se detectaron citocinas inflamatorias mediante ELISA. Se empleó bioinformática para predecir los sitios m6A en el ARNm de VEGFA y se realizó una transferencia Western para examinar los niveles de proteína. Se utilizaron ensayos de inmunoprecipitación de ARN metilado (MeRIP) y RIP para verificar la modificación y unión entre RBM15 y VEGFA. Se realizó un ensayo de actinomicina D para evaluar la estabilidad del ARNm. Se estableció un modelo de ratón ALI para evaluar el papel in vivo del eje RBM15/VEGFA. La tinción con HE se utilizó para evaluar la lesión del tejido pulmonar de ratones. Mientras tanto, la actividad mieloperoxidasa (MPO) se midió mediante colorimetría.
RESULTADOS: VEGFA exhibió una expresión elevada en el suero de pacientes con ALI y en células THP-1/M0 inducidas por LPS/IFN-γ. Además, el inhibidor de VEGFA y el silenciamiento de VEGFA restringieron la polarización M1 y contribuyeron a la polarización M2 de las células THP-1/M0 inducidas por LPS/IFN-γ acompañada por la reducción de los niveles de citocinas proinflamatorias (TNF-α, IL-12, IL-6 e IL-1β) y el aumento relativo de la citocina antiinflamatoria (IL-10). Además, RBM15 promovió la expresión de VEGFA mediante la modificación de m6A. El eje RBM15/VEGFA promovió la polarización M1 mientras inhibía la polarización M2 de las células THP-1/M0 inducidas por LPS/IFN-γ. La ALI se alivió inhibiendo el eje RBM15/VEGFA in vivo.
CONCLUSIÓN: RBM15 mejoró la expresión de VEGFA a través de la modificación de m6A, promoviendo así la polarización M1, inhibiendo la polarización M2 de los macrófagos y facilitando la progresión de ALI.
PubMed:40961397 | DOI:10.1097/SHK.0000000000002697